甘草(cao)中甘草(cao)苷的含量測定

Gancao

GLYCYRRHIZAERADIXETRHIZOMA
本(ben)品為豆科植物甘草(cao)(GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果(guo)甘草(cao)GlycyrrhizainflataBat.或光(guang)果(guo)甘草(cao)GlycyrrhizaglabralL.的干燥根和根莖。春、秋二季(ji)采挖，除去(qu)須根，曬(shai)干。

【性(xing)狀】甘草根(gen)呈圓柱形，長25～100cm，直徑0.6～3.5cm。外皮松緊不一。表面紅棕(zong)色或灰(hui)棕(zong)色，具顯(xian)著的縱皺(zhou)紋、溝(gou)紋、皮孔及稀疏(shu)的細(xi)根(gen)痕。質堅實，斷面略顯(xian)纖維性(xing)，
黃(huang)白色(se)，粉(fen)性，形成(cheng)層(ceng)環明(ming)顯，射(she)線(xian)放射(she)狀，有(you)(you)的有(you)(you)裂隙。根莖呈圓柱形，表面有(you)(you)芽痕，斷面中部(bu)有(you)(you)髓。氣微，味甜而特殊。
脹果甘草根(gen)(gen)和根(gen)(gen)莖木質(zhi)粗(cu)壯，有(you)的分枝(zhi)，外皮(pi)粗(cu)糙，多(duo)灰棕色或灰褐色。質(zhi)堅硬，木質(zhi)纖維多(duo)，粉性(xing)小。根(gen)(gen)莖不(bu)定芽多(duo)而粗(cu)大(da)。
光果甘草根(gen)(gen)和(he)根(gen)(gen)莖質地較堅實，有的分枝，外皮不粗糙，多灰棕色，皮孔細而不明顯。

【鑒別】(1)本品橫(heng)切面：木(mu)栓層為數(shu)列棕色細(xi)胞。栓內(nei)層較窄。韌(ren)皮部射線寬廣，多彎曲，常(chang)現裂(lie)隙；纖(xian)維多成束(shu)，非(fei)木(mu)化(hua)或微木(mu)化(hua)，周(zhou)圍薄壁(bi)細(xi)胞常(chang)含草酸(suan)鈣方晶(jing)；篩(shai)管群常(chang)因壓縮(suo)而變形。束(shu)內(nei)形成層明顯。木(mu)質部射線寬3～5列細(xi)胞；導管較多，直徑約至160μm；木(mu)纖(xian)維成束(shu)，周(zhou)圍薄壁(bi)細(xi)胞亦含草酸(suan)鈣方晶(jing)。根(gen)中(zhong)心無(wu)髓(sui)；根(gen)莖(jing)中(zhong)心有髓(sui)。
粉(fen)末淡棕(zong)黃色。纖維成束(shu)，直徑(jing)8～14μm，壁厚(hou)，微木化，周圍薄壁細胞含草(cao)酸鈣(gai)方(fang)晶(jing)，形成晶(jing)纖維。草(cao)酸鈣(gai)方(fang)晶(jing)多見。具(ju)緣(yuan)紋(wen)孔導管(guan)較大，稀有(you)網紋(wen)導管(guan)。木栓細胞紅棕(zong)色，多角形，微木化。
(2)取(qu)(qu)本品粉(fen)末1g，加(jia)(jia)乙(yi)醚40ml，加(jia)(jia)熱回(hui)流1小(xiao)時，濾過(guo)，棄去醚液(ye)(ye)，藥渣(zha)加(jia)(jia)甲醇(chun)(chun)30ml，加(jia)(jia)熱回(hui)流1小(xiao)時，濾過(guo)，濾液(ye)(ye)蒸干(gan)，殘(can)渣(zha)加(jia)(jia)水(shui)(shui)40ml使溶(rong)(rong)(rong)(rong)解(jie)，用(yong)正(zheng)丁(ding)(ding)醇(chun)(chun)提取(qu)(qu)3次(ci)，每次(ci)20ml，合并正(zheng)丁(ding)(ding)醇(chun)(chun)液(ye)(ye)，用(yong)水(shui)(shui)洗滌3次(ci)，棄去水(shui)(shui)液(ye)(ye)，正(zheng)丁(ding)(ding)醇(chun)(chun)液(ye)(ye)蒸于，殘(can)渣(zha)加(jia)(jia)甲醇(chun)(chun)5ml使溶(rong)(rong)(rong)(rong)解(jie)，作為供試品溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)。另(ling)取(qu)(qu)甘草對(dui)(dui)照藥材(cai)1g，同(tong)法制成對(dui)(dui)照藥材(cai)溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)。再取(qu)(qu)甘草酸單銨鹽對(dui)(dui)照品，加(jia)(jia)甲醇(chun)(chun)制成每lml含(han)2mg的(de)溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)，作為對(dui)(dui)照品溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)。照《薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法檢驗標準操作程序》(附錄(lu)ⅥB)試驗，吸取(qu)(qu)上述三(san)種溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)各l～2μl，分別(bie)點(dian)于同(tong)一(yi)用(yong)1％氫氧(yang)化鈉溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)(ye)制備的(de)硅(gui)膠G薄(bo)層(ceng)板上，以乙(yi)酸乙(yi)酯一(yi)甲酸一(yi)冰醋(cu)酸一(yi)水(shui)(shui)(15：l：1：2)為展開(kai)劑，展開(kai)，取(qu)(qu)出，晾干(gan)，噴
以10％硫酸(suan)乙(yi)醇溶液，在(zai)105℃加熱至斑(ban)點顯(xian)(xian)色(se)清(qing)晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色(se)譜(pu)中(zhong)，在(zai)與對照藥材色(se)譜(pu)相(xiang)應(ying)的位置上，顯(xian)(xian)相(xiang)同(tong)顏色(se)的熒光斑(ban)點；在(zai)與對照品色(se)譜(pu)相(xiang)應(ying)的
位置上，顯相同(tong)的橙黃色(se)熒光斑點。

【檢查(cha)】水(shui)分不得過12.0％(附錄ⅨH第一法)。
總灰分不得過7.0％(附錄(lu)ⅨK)。
酸(suan)不溶性灰分不得(de)過2.0％(附錄ⅨK)。
重金屬及有害元素(su)照鉛、鎘、砷(shen)、汞、銅測定法(fa)(附錄ⅨB原(yuan)子吸收(shou)分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa)或(huo)電感耦合等離子體質(zhi)譜法(fa))測定，鉛不(bu)(bu)得(de)(de)(de)過(guo)百萬(wan)(wan)分(fen)之五(wu)；鎘不(bu)(bu)得(de)(de)(de)過(guo)千萬(wan)(wan)分(fen)之三；砷(shen)不(bu)(bu)得(de)(de)(de)過(guo)百萬(wan)(wan)分(fen)之二(er)；汞不(bu)(bu)得(de)(de)(de)過(guo)千萬(wan)(wan)分(fen)之二(er)；銅不(bu)(bu)得(de)(de)(de)過(guo)百萬(wan)(wan)分(fen)之二(er)十(shi)。
有機(ji)氯(lv)(lv)農(nong)藥(yao)殘留量(liang)照(zhao)農(nong)藥(yao)殘留量(liang)測(ce)(ce)定(ding)法(附(fu)錄ⅨQ有機(ji)氯(lv)(lv)類農(nong)藥(yao)殘留量(liang)測(ce)(ce)定(ding))測(ce)(ce)定(ding)，六(liu)六(liu)六(liu)(總(zong)BHC)不得過千萬分(fen)之二(er)；滴滴涕(總(zong)DDT)不得過千萬分(fen)之二(er)；五(wu)氯(lv)(lv)硝基苯(PCNB)不得過千萬分(fen)之一。

【含(han)量測定(ding)】照《高效液相色譜法檢驗標準操作(zuo)程序》測定(ding)。
色譜條件與系(xi)統(tong)適(shi)用性試驗以十八烷基硅烷鍵合(he)硅膠為(wei)填充劑，以乙腈為(wei)流(liu)動相A，以0.05％磷酸(suan)溶(rong)液(ye)為(wei)流(liu)動相B，按下表中的規定進(jin)行梯度洗脫；檢(jian)測波長為(wei)237nm。理(li)論
板(ban)數按(an)甘草苷(gan)峰(feng)計算應(ying)不低于5000。
時(shi)間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）
0~8        19                 81
8~35 ;       19~50   ;     81~50
35~36      50~100      50~0
36~40       100~19     0~81
對(dui)照品溶液(ye)的制(zhi)備取甘(gan)草苷(gan)對(dui)照品、甘(gan)草酸(suan)(suan)銨對(dui)照品適量(liang)，精密稱定，加(jia)70％乙醇分別制(zhi)成每1ml含甘(gan)草苷(gan)20μg、甘(gan)草酸(suan)(suan)銨0.2mg的溶液(ye)，即得(de)(甘(gan)草酸(suan)(suan)重量(liang)一甘(gan)草酸(suan)(suan)銨重量(liang)／1.0207)。
供試品溶(rong)液的制備取(qu)本品粉末(過三號篩)約O.2g，精
密(mi)稱(cheng)定，置(zhi)具塞錐形瓶中，精密(mi)加入70％乙醇(chun)100ml，密(mi)塞，稱(cheng)
定(ding)重量(liang)，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)30分鐘，放冷(leng)，再
稱(cheng)定重(zhong)量，用70％乙醇補足(zu)減失的重(zhong)量，搖(yao)勻，濾過(guo)，取(qu)續濾
液，即得。
測定法分別精密吸取對照品(pin)溶液與供試品(pin)溶液各
10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干(gan)燥品計算，含甘(gan)草苷(C21H22O9)不得(de)少于(yu)0.50％，甘(gan)草酸(C42H62O16)不得(de)少于(yu)2.0％。